移液陷阱大全,天天实验却没注意到的这些细节!

 实验结果的准确性和可重现性,对于科研工作者的重要性是不言而喻的。

  在实验的过程中,有时候明明是相似的实验过程,却因为一些失之毫厘的误差,让结果差之千里。

  其中很大一部分原因来自于我们几乎每天都要使用的移液器,“正确使用移液器”听上去像是每个实验人员早已学会的基本操作,但实际上由于移液失误造成误差的情况数不胜数。

  道理很简单:

  那些习以为常的事物,往往会成为最容易被忽略的疏漏之处!

  今天就让我们回到最初的样品处理过程,来审视自己是否避开了每一步的陷阱。不论你是移液新手,还是用“枪”大师,都值得收藏这一篇事无巨细的操作指导!

  我们的目标是:用好移液器,每天不加班!

  组成精准的移液系统

  一,挑选合适的吸头

  吸头作为实验室常用的一次性耗材,其重要性常常被忽视。

  低质量的吸头不仅会存在残留污染物到样品中的风险,而且还会影响到移液系统的密封性以及精准性。反之,高质量的吸头具有光滑无瑕疵及高度的均一性,如此才能保证实验结果的重现性。

  二,选择合适量程的移液器

  移液器最大量程的30%-100%是推荐适用范围,在移液时,吸头内的空气柱体积越小,误差越低。

  假如实验中需要移取的液体体积为100μL,小E会推荐选择10-100μL量程的移液器,如下图所示,虽然不同量程的移液器都可用于移取100μL,但准确度和精准度差异会很明显。

  









三,刻度调节有玄机


  在刻度调节时,从大量程调节至小量程,精度最佳;从小量程调节至大量程,最好先调至略大一点,再返回。

  





四,移取液体小窍门


  01.保证垂直吸液,根据流体静力压原理,移液器斜着吸液将使体积偏大。

  







02.吸头尽量浸没得浅一些,防止液体残留在吸头表面;但是同时要浸没得足够深,防止吸取空气,下表是针对不同量程移液器建议的浸没深度。


  







03.至少预润湿3次,使得空气柱充满饱和的液体分子(特别是在移取易挥发性液体时),可最大限度降低空气柱带来的误差。如下图所示,在100μL的移液中,第一次和第二次移液体积偏小,3次以上,移液体积越来越接近设定体积。


  








04.吸、放液体应该缓慢、匀速,以提高移液精准性。因此推荐大家使用电动移液器,电动马达驱动,减少人为误差,提高精准度。


  05.吸取液体后稍稍停留一会儿(特别是对于大量程移液器),此处小E温馨提醒,不用担心漏液,好的移液系统是不存在漏液问题的(小E骄傲脸)

  五,合适角度打出液体

  成功完成精准移液

  放液时注意吸头尖端靠在容器内壁,特别是对于20μL以下的体积尤为重要。

  移液器角度为20°~45°,体积低于10μL直接放液到容器底部。

  如果按照操作做到了这里,那么恭喜你!这是精准移液的最后一步,相信用枪高手如你掌握角度一定早已游刃有余,完成这一步,收获完美结果!

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